世界首例手工克隆綿羊誕生已逾兩個月，各項指標穩定

　　圖為鵬鵬和它的代孕母羊。 劉鵬 攝

目前世界上首例采用手工克隆技術獲得的轉基因克隆綿羊，誕生至今已逾兩個月。目前，其體重已達17.28公斤，健康狀況良好。而且最近的取樣分析發現，轉入其細胞內的“ω—3脂肪酸去飽和酶基因fat—1”已經表達。

“這表明此次手工克隆羊工程取得了初步成功。下一步，我們還會對手工克隆羊的生長發育進行跟蹤研究，后續過程還有很多難題有待突破。”深圳華大基因研究院副總裁、華大方舟公司總經理杜玉濤不敢輕言樂觀。

這項技術突破，是由深圳華大基因研究院與中科院遺傳發育所、石河子大學生命科學學院聯合開展的。到底什么是手工克隆技術？它與我們常講的克隆有何不同？手工克隆羊的誕生，在科技創新上有哪些意義？日前，記者采訪了深圳華大基因有關研究人員，一一尋求這些問題的答案。

有何不同？

跟常規克隆相比，手工克隆最大的不同是在第二個步驟——重構胚胎

杜玉濤介紹，手工克隆最早于2001年出現，也不是最新的技術，但之前只是用在克隆牛、豬上，克隆羊的成功，還是首次。

“跟常規克隆相比，手工克隆最大的不同是在第二個步驟——重構胚胎。”華大基因轉基因手工克隆羊項目負責人劉鵬介紹，在動物卵母細胞的外圍，有一層堅韌的透明帶，像“蛋殼”一樣包裹著卵母細胞。要給它換“蛋黃”，就必須先把這層“蛋殼”解決掉。這也是克隆過程中的關鍵環節。

到底什么是手工克隆，這要從手工克隆羊誕生的過程說起。

3月26日12時16分，第一頭轉基因克隆羊成功誕生，初生體重5.74公斤，取名鵬鵬。目前，它各項生命體征正常。

鵬鵬來源于一項名為“農業部綿羊轉基因新品種培育重大專項”的863課題。“2009年9月，當時課題還沒申請下來，我們預先開展先期準備，從新疆一只‘中國美利奴’品種的健壯種公羊的耳朵上取了一塊組織帶回深圳，建立轉基因細胞系?！倍庞駶f。

劉鵬介紹，所謂建轉基因細胞系，是指在獲取的公羊體細胞中插入“ω—3脂肪酸去飽和酶基因fat—1”，經過一段時間的增殖，篩選出顯示該基因陽性（也就是基因已經成功插入）的細胞，再行增殖，形成一定數量的轉基因細胞。

之后，就是手工克隆的關鍵步驟：2010年10月，項目獲批3個月后，研究人員將這批細胞帶到新疆，開始手工克隆實驗。首先獲取母羊的一些卵母細胞，抽去細胞核，只留下細胞質。就像“取出雞蛋的蛋黃”那樣，把承載遺傳信息的細胞核清除掉。再將之前獲得的轉基因細胞融入進去，猶如植入一顆新的“蛋黃”，使之融為一體。

這顆全新的“雞蛋”雖然來自兩個不同的個體，但它只有一套遺傳基因，全部來自同一只羊。新生的細胞在電擊激活和化學激活后開始以2的N次方速度分裂發育，經過6—7 天后，形成一個囊胚。“這個步驟叫重構胚胎的激活和體外培養，最后得到的囊胚，肉眼下只是小小的一點，放在顯微鏡強光下勉強可以看見?！眲Ⅸi說。

最后一個步驟是孕產：重構胚胎發育到囊胚后，2011年10月底到11月初，研究人員將其移植到代孕母羊子宮內，經過5個月的懷孕期，鵬鵬誕生。